ANALISI STRUMENTALE DEI FARMACI M - Z

Al termine del corso lo studente: -acquisisce conoscenze teoriche delle separazioni cromatografiche e di elettroforeresi capillare; -sarà in grado di applicare le conoscenze acquisite per lo sviluppo di metodi strumentali per l'identificazione quali-quantitativa di farmaci nella ricerca chimico-farmaceutica, farmacologica, clinica e nel controllo di qualità in aziende farmaceutiche e farmacie ospedaliere; -acquisisce nozioni di base sui metodi cromatografici di enantioseparazione di farmaci chirali; -acquisisce conoscenze per la convalida di metodi analitici per l'allestimento di dossier per la registrazione e l'immissione sul mercato di nuovi farmaci; -acquisisce nozioni di base sull'uso di metodologie analitiche utili nello studio del legame farmaco/proteina bersaglio per lo sviluppo di nuovi farmaci.

Superamento e/o buona conoscenza dei seguenti corsi: Chimica Generale ed Inorganica, Fisica, Chimica Organica.

Il corso prevede lezioni frontali e esercitazioni di gruppo in laboratorio. La frequenza in aula è obbligatoria. Il limite massimo di assenze consentite è, come da regolamento didattico, del 30%, superato tale limite non sarà possibile accedere alle esercitazioni pratiche di laboratorio.

Ogni anno accademico per poter frequentare il corso è OBBLIGATORIO prenotarsi tramite e-mail all'indirizzo lpasquin@unict.it indicando nell'oggetto Inscrizione al corso di Analisi strumentale dei farmaci (M-Z). La prenotazione deve essere effettuata 48 ore prima della data di inizio delle lezioni frontali.

Introduzione ai metodi analitici strumentali. Classificazione e dei metodi analitici strumentali. Scelta del metodo analitico.

Tecniche cromatografiche. Principi generali del processo cromatografico e parametri cromatografici. Costante di distribuzione. Tempo di ritenzione. Fattore di ritenzione. Selettività. Efficienza: teoria dei piatti; equazione di van Deemter; fattori extracolonna. Asimmetria picchi cromatografici. Risoluzione.

Cromatografia liquida: fase stazionaria, fase mobile. Cromatografia liquido-solido, cromatografia liquido-liquido, cromatografia di scambio ionico, cromatografia di coppia ionica, cromatografia di esclusione molecolare, cromatografia di affinità.

Cromatografia su colonna, cromatografia su strato sottile (TLC). Cromatografia liquida ad alta prestazione (HPLC): strumentazione.

Gascromatografia (GC): aspetti strumentali, tipologie di fase stazionaria, rivelazione in GC.

Separazione cromatografica enantioselettiva: metodo diretto con uso di fasi stazionarie enantioselettive. Metodo indiretto con derivatizzazione con reagenti a stereochimica definita.

Elettroforesi Capillare (EC): strumentazione, principi teorici, parametri analitici.

Tecniche combinate: cromatografia liquida e rivelatore UV-VIS a fotodiodi (HPLC-DAD), cromatografia liquida e spettrometria di massa (HPLC-MS), gascromatografia e spettrometria di massa (GC-MS). Analisi qualitativa e quantitativa.

Preparazione del campione e metodi estrattivi. Metodi di estrazione classici (liquido/liquido e liquido/solido). Estrazione con fluidi supercritici (SFE). Estrazione in fase solida (SPE). Preparazione di campioni da matrici biologiche complesse.

Convalida del metodo analitico: linearità, precisione, accuratezza, riproducibilità, limite di rivelabilità o detenzione (LOD) ed il limite di quantificazione (LOQ).

Sviluppo di metodi cromatografici necessari per l'allestimento di dossier per la registrazione e l'immissione sul mercato di nuovi farmaci. Sviluppo di metodi analitici per il controllo qualità nelle aziende farmaceutiche e nelle farmacie ospedaliere. Sviluppo di metodi analitici per il dosaggio di farmaci in materiali biologici nella ricerca farmaceutica e nel monitoraggio clinico dei farmaci. Determinazione delle interazioni farmaco/proteina bersaglio, mediante cromatografia di affinità ad alte prestazioni, utili per lo sviluppo di nuovi farmaci.

ESERCITAZIONI DI LABORATORIO

Cromatografia liquida ad alte prestazioni

Ottimizzazione della separazione di farmaci mediante HPLC: studio dell'efficienza, della selettività e della risoluzione al variare della fase stazionaria, della composizione della fase eluente e del flusso. Calcolo di parametri cromatografici (fattore di capacità, fattore di selettività, risoluzione, numero di piatti teorici, asimmetria del picco). Determinazione quali/quantitativa di molecole di interesse farmaceutico. Separazione e riconoscimento di specie inorganiche mediante cromatografo ionico ad alte prestazioni.

1. V. CAVRINI, V. ANDRISANO. Principi di Analisi Farmaceutica. Società Editrice Esculapio, Bologna. Terza edizione: gennaio 2013.

2. Veronica R. Mayer, Practical High Performance liquid Chromatography, Wiley (testo di consultazione).

3. Dispensa sugli argomenti trattati nelle lezioni frontali. Metodiche analitiche da eseguire in laboratorio. articoli e reviews su argomenti specifici.

L'esame si svolge mediante prova scritta costituita da 4 domande a risposta aperta riguardanti gli argomenti trattati nelle lezioni frontali. Il tempo a disposizione per lo svolgimento della prova è di 90 minuti. Il superamento della prova scritta dà accesso ad un collloquio orale.

1. Descrivere la CROMATOGRAFIA SU STRATO SOTTILE
2. Descrivere la STRUMENTAZIONE HPLC